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液相色谱仪等度与梯度的区别
赛伦仪器 / 2016-03-24

关于液相色谱仪等度洗脱与梯度洗脱的区别与应用:

 

        等度洗脱是指实验过程中从头到尾只用一种流动相,也就是只用一个泵,输送同一种流动相。而所谓梯度洗脱,就是有两种或两种以上不同极性的溶剂,在分离过程中按照一定程序连续地改变,以改变流动相的配比和极性,通常用的流动相为二元溶剂,从而可以使一个复杂样品中性质(极性)差异较大的组分达到良好的分离目的。

 

        等度洗脱只需要配置一台高压泵,配置相对简单,成本低;梯度洗脱需要配置两台高压泵,一个混合器及连接管理,配置较高。

 

梯度洗脱相比于等度洗脱所具有的优势:
a、减少手工比例配比流动相,从而避免由此引起的误差;
b、避免混合物容量因子范围宽时分析时间长的缺点;
c、避免早流出峰分离度不好的缺点;
d、避免晚流出峰峰变快峰高降低的缺点;
e、避免保留时间长的组分污染色谱柱的缺点。

 

什么情况下适合选择梯度液相色谱仪:
a、大分子样品,相对分子质量大于1000的,尤其是生物样品;
b、具有较宽容量因子范围的样品,即组分较为复杂的;
c、一些含有高保留时间的组分会干扰样品分析,如果在一次分析中不能把它洗脱出去,就会残留污染色谱柱,并影响下一次的样品分析;
d、即使在使用等度时也可以使用梯度洗脱选择流动相的比例。

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